녹아웃(KO) 마우스 | Cyagen Korea
  1. Home
  2. 커뮤니티
  3. 프로모션
  4. 인간 게놈 규모의 CRISPR-Cas9 녹아웃 세포 라이브러리

Cyagen은 풍부하고 고품질의 세포 균주에 대한 고객의 신속한 접근을 촉진하고 세포 은행 자원을 확장하기 위해 성숙한 Smart-CRISPR™ 세포 편집 플랫폼 및 세포 배양 시스템에 의존하여 거의 20,000개의 전체 게놈 녹아웃(KO) 세포 모델을 구축할 계획을 시작했습니다. 우리는 기초 연구, 항체 검증, 약물 검사, 질병 진단, 치료 및 검출에 대한 강력한 지원을 제공하기 위해 최선을 다하고 있습니다. 이제 HEK293T, A549, HCT116, Hela 등의 KO셀을 재고로 주문하실 수 있으며, $2,000의 저렴한 가격으로 모노클로널 호모조이고트를 구매하실 수 있습니다. 자세한 내용은 86 20-31601779로 문의하거나 [email protected] 으로 이메일을 보내 주십시오.

*원하는 셀/유전자를 찾을 수 없는 경우 $5,999부터 시작하여 연구 필요에 따라 빠른 8주 내에 배송되는 맞춤형 KO 셀 서비스를 추천합니다. 지금 클릭하여 문의하시기 바랍니다.
세포 유전자면 NCBI ID 품종 배송 사양 주문
{[ item.cell_name ]} {[item.gene_symbol]} {[item.gene_id]} {[item.taxon]} {[item.deliverable]}
*검색한 세포/유전자는 현재 KO 세포 라이브러리에 포함되어 있지 않습니다. 우리는 5,999달러부터 시작하여 당신의 연구 요구를 충족시키기 위해 8주 안에 배송되는 우리의 맞춤형 KO 셀 서비스를 추천합니다. 아래 양식을 작성해 주시면 바로 연락 드리겠습니다.
성공을 보장하는 3가지 주요 이점
독창적인 Smart-CRIS PR™ 기술
지능형 Smart-CRISPR™ 세포 유전자 편집 시스템을 통해 유전자 녹아웃, 녹인 등 다양한 전략을 손쉽게 구현할 수 있어 90%의 높은 편집 효율을 달성할 수 있습니다.
성숙한 유전자 편집 기술 플랫폼
체외 세포 실험부터 생체 내 동물 실험까지, 우리는 수만 건의 성공적인 유전자 편집 프로젝트를 완료했고, 1,000건 이상의 성공적인 세포 라인을 구축했으며, 동료 검토 간행물에서 수많은 표창을 받았습니다. 세포 유전자 발현 조절, 세포 기능 검증, 마우스 질병 모델 구축, 표현형 분석 등 전 과정 서비스를 제공할 수 있습니다.
대규모 종합 과학 셀 라이브러리
새로 업그레이드된 전달 벡터는 HDR 효율성이 최대 50%, 감염 효율성이 50% 이상, 감염 실행 가능성이 80% 이상입니다. 우리는 과학적인 연구 목적을 위해 다양한 종류의 세포주를 제공합니다.
세포 유전자 편집 워크플로우
지능형 Smart-CRISPR™ 세포 유전자 편집 시스템, 지금 경험해 보십시오

Smart-CRISPR™Cell Gene Editing System

서비스 사례 - THP-1 유전자 편집

Di-(2-에틸헥실) 프탈레이트(DEHP) 노출은 마우스 고환에서 HIF-1α/HO-1 신호 경로를 통해 페롭토시스를 유발합니다.

연구 계획:
1. DEHP 자극이 생체 내 및 시험관 내 고환 손상을 일으킬 수 있는지 확인합니다.
2. 오믹스 분석 및 실험 검증은 HIF-1α와 같은 비정상적인 신호 경로를 나타냅니다.
3. HIF-1α 신호 전달 경로의 작용 메커니즘을 탐구합니다.
4. 체외에서 HIF-1α를 제거하여 HIF-1α의 역할을 추가로 검증합니다.

엄격한 연구를 수행하려면 프로세스의 각 단계에서 결과를 검증하는 완전한 실험 워크플로우가 필요합니다. 일반적으로 오믹스 분석은 유전자를 과학적으로 선별하는 데 사용되며, 여러 실험 결과는 교차 검증되어야 합니다. 유전자 녹아웃(KO)은 여전히 유전자 기능 연구를 위한 전통적인 전략 중 하나입니다. 성공적인 유전자 KO 세포주는 유효성 검사 결과의 정확성에 매우 중요합니다.

본 연구에서 저자들은 MEHP 자극 후 표현형 분석, RNA-Seq 분석, ChIP-qPCR 분석을 사용하여 고환 기능 장애와 관련된 조절 유전자를 확인하였습니다: HIF-1α. 그들은 또한 예비 규제 메커니즘을 발견했습니다: MEHP(생체 내 DEHP의 주요 생물학적 대사물)는 PHD를 억제하고, HIF-1α 축적 및 안정성에 영향을 미치고, HIF-1α를 핵으로 이동시키고, 라이디그 및 세르톨리 세포에서 HIF-1/Hmox1의 결합을 유도하여 HO-1 발현의 상향 조절을 유도할 수 있습니다. HO-1의 과발현은 철 과부하(저혈증), ROS 축적을 초래하고 궁극적으로 페로토시스를 일으켜 레이디그와 세르톨리 세포의 생존 가능성을 손상시킵니다.

이러한 결과를 더욱 확인하기 위해 연구원들은 후속 실험에 HIF-1α 유전자 KO(HIF-1α 유전자 KO Leydig 및 Cyagen에서 제공하는 세르톨리 세포)와 함께 레이디그 및 세르톨리 세포를 사용했습니다. Sanger 시퀀싱과 Western Blotting은 KO 세포 라인에서 HIF-1α의 성공적인 녹아웃을 확인하기 위해 사용되었습니다. 야생형 세포와 비교했을 때, HIF-1α-KO 세포주는 MEHP 자극 하에서 세포 생존 가능성 손상 정도가 상당히 개선되었습니다.

한편, 지질 과산화(그림 1B, I) 및 철 과부하(그림 1C, J)는 억제되었습니다. Hmox1과 HO-1의 발현은 각각 qPCR과 웨스턴 블랏을 사용하여 평가되었으며, Hif-1α를 녹아웃하면 MEHP 자극 하에서 Hmox1(그림 1D, K)과 HO-1(그림 1G, N) 발현 수준의 상향 조절을 역전시킬 수 있음을 보여주었습니다.

또한 MEHP 자극 후 ROS 버스트(그림 1E, L) 및 세포사(그림 1F, M) 수준도 HIF-1α 녹다운 후 감소했습니다.

Western Blotting은 녹다운 HIF-1α가 ACSL4, FTH1 및 SLC7A11의 발현을 복구하고 GPX4의 발현을 억제하는 것을 보여주었습니다(그림 1G, N). 전반적으로, 이러한 연구 결과는 MEHP 자극이 고환 레이디그 및 세르톨리 세포에서 HIF-1α 의존적인 방식으로 페롭토시스를 유발한다는 것을 시사합니다.