NCI-H358: KRAS G12C 변이를 보이는 폐암 모델
바르데-비델 증후군(Bardet-Biedl Syndrome, BBS)은 다양한 증상이 나타나는 희귀 유전 질환으로, 시신경 퇴행이 포함될 수 있습니다. BBS는 인구에서 매우 낮은 유병률을 보이며, 10만 명당 1명 미만의 환자만을 차지합니다. BBS 환자는 복부 지방 축적과 관련된 비만 문제를 겪을 수 있으며, 일반적으로 지적 장애를 동반합니다.
NCI-H358 세포주 개요
NCI-H358은 인간 비소세포 폐암(NSCLC) 세포주로, KRAS 유전자 변이와 관련된 연구에 널리 사용됩니다. KRAS G12C 변이는 NSCLC에서 상대적으로 흔하며, NCI-H358 세포주는 이 변이를 보유하고 있어 종양 세포의 신호 전달 및 증식에 결정적인 역할을 합니다. KRAS G12C 변이를 가진 종양 세포는 특정 KRAS 억제제에 민감성을 보일 수 있습니다. 이에 따라 NCI-H358은 KRAS 억제제(예: 소토라시브(AMG 510))를 포함한 약물 스크리닝에 매우 유용하며, 이 약물은 KRAS 변이 단백질의 12번 아미노산 자리에 있는 시스테인 잔기에 공유 결합을 형성함으로써 활성을 억제하고 하류 신호 전달 경로에 영향을 미칩니다.
NCI-H358 세포주 세부 정보
세포명: NCI-H358 (인간 비소세포 폐암 세포)
카탈로그 번호: TCHu151 (중국과학원)
성장 특성: 상피세포 유사 형태, 부착성 성장
배양 조건: 1640 배지 + 10% FBS
배양 환경: 공기 95% + CO₂ 5%; 37°C
NCI-H358의 폐암 연구 응용
NCI-H358 세포는 다음과 같은 다양한 폐암 연구 응용에 필수적입니다:
- 약물 스크리닝: NCI-H358 세포는 다양한 항암제에 민감성을 보이며, 특히 KRAS G12C 변이를 표적으로 하는 신약의 효과를 평가하기 위한 이상적인 모델입니다.
- 유전자 기능 연구: 연구자들은 NCI-H358을 사용하여 특정 유전자의 폐암에서의 역할을 유전자 녹아웃 또는 과발현 실험을 통해 연구합니다.
- 신호 경로 분석: 이 세포주는 KRAS 경로와 관련된 세포 내 신호 네트워크를 조사하는 데 사용됩니다.
- 종양 미세환경 시뮬레이션: NCI-H358은 종양 세포와 주변 세포(예: 면역세포 및 스토마세포) 간의 상호작용을 연구하는 데 활용되며, 종양 미세환경에 대한 통찰을 제공합니다.
NCI-H358 세포 배양 단계별 가이드
세포 배양 절차
- 해동 과정을 시작하기 위해 원심분리 튜브에 완전 배양 매체 6mL를 추가합니다.
- 빙하가 밥알 크기로 녹을 때까지 수조에서 세포를 해동한 후 수조를 중단합니다.
- 세포를 원심분리 튜브로 이동하고 원심분리합니다.
- 세포를 재현탁하여 적절한 크기의 배양 접시에 뿌립니다.
- 24시간 후 세포 부착 여부를 관찰하고 한 번 배양 매체를 교체합니다.
- 상층액을 제거하고 실온 PBS로 한 번 세척합니다.
- 트립신을 추가하여 접시 바닥 전체를 균일하게 덮도록 합니다.
- 접시를 두드리며 일부 세포가 탈락하기 시작할 때까지 소화를 진행한 후 소화를 중단합니다.
- 세포를 부드럽게 피펫팅하여 분산시킨 후 원심분리 튜브로 이동하여 원심분리합니다.
- 세포를 재현탁하여 적절한 비율로 뿌립니다.
- 세포를 소화하고 원심분리하여 세포 침전물을 얻습니다.
- 세포를 동결 보존 용액에 재현탁하여 동결용 튜브로 이동합니다.
- 사전 냉각된(4°C) 제어 속도 동결 장치에 동결용 튜브를 넣은 후, 다음 날 -80°C 냉장고에 오버나이트 보관합니다.
- 다음 날 동결용 튜브를 액체 질소에 이동하여 장기 보관합니다.
NCI-H358 세포 배양 시 주의사항
- 혈청 품질: 고품질 태아소우혈청을 사용하시고, 필요 시 농도를 약간 증가시키는 것을 고려하시기 바랍니다.
- 소화 모니터링: 소화 과정을 면밀히 모니터링하여 과도한 소화를 피하십시오.
- 매체 교체: 세포 밀도가 증가함에 따라 매체를 정기적으로 교체하거나 세포를 전달하여 최적의 성장 조건을 유지하십시오.
NCI-H358 세포를 위한 유전자 편집 기술: Smart-Targeted Gene Editing™ 활용
Cyagen은 Smart-Targeted Gene Editing™ 시스템을 활용하여 NCI-H358 세포주에 대한 포괄적인 유전자 편집 서비스를 제공하며, 정밀하고 효율적인 유전적 변형을 보장합니다.
유전자 변형 프로젝트
NCI-H358 세포주에서의 유전자 변형에는 유전자 녹아웃(KO), 포인트 변이, Knock-in(KI), 과발현 및 간섭이 포함됩니다. Cyagen은 NCI-H358의 배양 조건과 단일세포 클론 제조를 최적화하여, NCI-H358 유전자 편집 단일세포 클론 세포를 제공합니다. 이는 실험의 정확성과 신뢰성을 크게 향상시키며, 종양 면역학 연구에 더 견고한 기반을 제공합니다.
유전자 녹아웃
유전자 편집 주의사항
- 전형 전 세포 상태가 양호한지 확인하시며, 세포 밀도가 약 70% 정도가 되도록 하십시오.
- 소화 과정에서 세포를 가능한 한 단일 세포로 분산시키도록 시도하십시오.
- 한계 희석법을 사용하여 단일세포 클론을 준비하시고, Cyagen의 맞춤형 배양 매체를 사용하며 추가로 10%의 혈청을 첨가하십시오. 클론이 관찰된 후 신선한 배양 매체를 보충하고 계속 배양하십시오.
결론
NCI-H358 세포주는 KRAS G12C 변이를 연구하는 데 특히 유용한 강력한 도구입니다. 세포 배양 및 유전자 편집에 대한 최선의 실천 방법을 따르면, 연구자들은 암 생물학 및 치료 전략에 대한 새로운 통찰을 얻을 수 있습니다. Cyagen의 유전자 편집 전문성은 NCI-H358 세포의 연구 가능성을 더욱 향상시키며, 정밀하고 신뢰할 수 있는 변형을 제공하여 혁신적인 연구를 지원합니다.
Cyagen의 맞춤형 세포주 유전자 편집 서비스
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