고지 고콜레스테롤 고과당 음식 유도 NASH 마우스 모형

NASH 마우스 모델 개요

질병 동물 모델은 인간의 질병 발생 발전 메커니즘, 약물 선별 및 치료 효과 평가에 필수적인 도구로 좋은 질병 동물 모델은 신약 개발에 속도를 낼 수 있습니다. 당신은 아직도 어떤 마우스 모형을 선택해야 할지 몰라 걱정하고 있습니까? 당신은 아직도 모형을 만드느라고 걱정하니? Cyagen 새로운 칼럼 '매주 마우스'는 매주 쇄신하며 질병쥐 모델의 이야기를 들려드리며 다양한 질병쥐 모델을 이해하는 데 도움이 되기를 바랍니다. 오늘은 고지 고콜레스테롤 고과당 음식 유도 NASH 마우스 모형을 만나 보겠습니다.

동물에게 고지방, 고당 사료를 먹이는 지방간 모델을 주는데, 그 주요 발병 메커니즘은 영양 과잉입니다. 음식물 중 지방, 콜레스테롤, 당류 과잉은 완전히 흡수되지 못하고, 지방은 간에 쌓여 지방간을 유발하며, 간염성변경 및 섬유화가 추가되었습니다. 사람의 비알코올성 지방성 간질환(NAFLD)과 비슷한 모델로 가장 흔한 NAFLD 동물 모델입니다.

Cyagen의 고지 콜레스테롤인 고과당사료(GAN)수유를 통해 구축된 NASH 마우스 모델은 비알코올성 지방간의 병리적 생리기제 및 신약개발을 설명하는 동물모델로 사용됩니다.

모델 구축 전략

Gubra-Amylin NASH(GAN) 사료, 즉 고지방 고콜레스테롤 고과당 사료(40% 지방공급, 20% 과당, 2% 콜레스테롤)로 생쥐를 26주 이상 먹인다. (보통 16주부터 지방변성이 나타나기 시작해 26주 NASH 형성, 26~32주 섬유화 유도)

모형 검증

1. 체중 및 혈생화 검사

그림1. GAN 고지방 고콜레스테롤 고과당 음식로 유도한 NASH 모델의 체중 및 혈생화 검사.

야생형 C57BL/6수컷 쥐를 무작위로 10마리씩 2조로 나누어 표준사료(control조)와 고지방, 고콜레스테롤, 고과당사료(NASH그룹)로 각각 먹입니다. 시간대별로 (A) 체중, (B) 6h 공복혈당치, (C) ALT 농도, (D) AST 농도, (E) 혈청 총콜레스테롤(TC) 농도를 측정한다. 데이터는 Mean±SEM 으로 표시됩니다. Two-way ANOVA 를 이용한 통계학 분석. ns: not significant, *: p<0.05, **: p<0.01, ***: p<0.001, ****: p<0.0001.

결과 : 모델링 30주 시 NASH그룹 생쥐의 체중, 6h 공복혈당치, 혈청중 ALT, AST, TC 농도가 대조그룹보다 현저히 높았습니다.

2. 간 중량, 간 무게 대비 체중 비율, 간 조직 부피 검사

그림 2. 고지방 고콜레스테롤 고과당 식이유도를 이용한 NASH 모델의 간 조직 검사합니다.

모델링 후 16주차부터 동차 대조조와 NASH조 마우스 2마리를 시간별로 해부 관찰하여 (A) 간 무게,(B) 간 무게/체중, (C) 사육 후 26주차 마우스의 간 조직을 검사합니다. 데이터는 Mean±SEM 으로 표시됩니다. Two-way ANOVA 를 이용한 통계학 분석. ns: not significant, *: p<0.05, **: p<0.01, ***: p<0.001, ****: p<0.0001。

결과: NASH조 마우스의 간 무게, 간 무게 비중, 간 조직 부피가 대조군에 비해 모두 높아진 것으로 나타났습니다.

3. 간 조직 병리 절편 및 NAS 평점

그림 3. 고지방 고콜레스테롤 고과당 식사로 유도한 NASH 모델의 병리절편 및 NAS 평점입니다.

사육한 지 26 주 후 쥐의 간 조직 병리 슬라이스: (A) 정상 대조조 마우스의 간소엽 구조는 선명하고 완전하며 간세포는 중앙정맥을 중심으로 방사형으로 배열되어 있으며, 간세포 풍선변이나 염증세포 침윤이 없음. (B) NASH 조 마우스의 간조직 소엽 구조가 문란하고, 대포성 지방 방울이 전체 세포의 2/3 이상을 차지하며, 심각한 지방 변성이 나타나며, 국소적으로 침윤을 위주로 하는 난로 괴사성 염증; 붉은 화살표: 지방 변성; 파란색 화살표: 풍선처럼 변합니다. (C) NASH조 마우스의 간섬유화는 F2급 기준(moderate중도섬유화)에 도달할 수 있습니다. 붉은색 화살표:섬유화. (D)NAS 평점. 데이터는 Mean±SEM 으로 표시됩니다. Two-way ANOVA 를 이용한 통계학 분석. ns: not significant, *: p<0.05, **: p<0.01, ***: p<0.001, ****: p<0.0001。Scale bar = 100 µm.

간조직 병리절편 결과, 모형 만든 26주 후 대조조에 비해 NASH조 마우스의 간조직에서 지방변성, 풍선변성, 섬유화가 뚜렷하게 나타났습니다. 또한 NASH조 마우스의 NAS 평점은 모델링 후 16주차부터 모두 5점을 기록하여 대조조과 큰 차이를 보였으며, NASH 마우스는 모델링에 성공했습니다.

Cyagen은 음식유도 비알코올성 지방간 마우스 모형 외에도 다양한 비알코올성 지방간 마우스 모형(예를 들어 화학물질 유발 모델, 유전자 편집 기술, 복합 모델) 및 표형 분석서비스를 제공한다. 필요하다면 당신의 연구를 위한 맞춤 제작을 위해 [email protected]로 연락 주세요.

About Cyagen

Cyagen은 15 년 동안 발전해 전 세계 수만 명의 과학자에게 봉사했으며, 제품과 기술은 CNS(Cell, Nature, Science) 3 대 저널을 포함한 4500 여 편의 학술 논문에 직접 적용되었습니다. 유전자녹아웃, 유전자노크인, 조건부 녹아웃 모델 맞춤형 서비스 외에도 Cyagen에는 전문적인 수술질환 모델팀이 있어 다양하고 세밀한 작은 동물수술 질병모델을 제공할 수 있습니다. 약물선별평가 생쥐 플랫폼은 구미 업계 리더로부터 도입한 면역결핍쥐, 심혈관 및 알츠하이머병 등의 연구에 사용되는 인간화 마우스를 제공할 수 있습니다. 국제 표준화 무균쥐 기술 플랫폼은 무균쥐, 무균동물 맞춤형 서비스, 미생물 균군 이식 서비스 등 무균동물 모델에 기반한 각종 제품과 서비스를 제공할 수 있으며, Cyagen의 성숙하고 안정적인 유전자 편집 생쥐 플랫폼과 결합하여 균군과 유전자의 상호작용 메커니즘을 연구하는데 도움을 줄 수 있습니다.